差速离心法干什么用?
发布时间：2021-04-26 07:01:02
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来源：中华网
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如果不特别说明，离心一般是在一定的转速下进行一段时间，将要分离的东西分开：
1、而差速离心则是用一定的转速将物质分成两部分后，将上清液再用更高的转速离心，分成层后如果需要还要用更高的转速再将上清液离心，直到将物质完全分成不同的层次为止。是交替使用低速和高速离心，用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离的方法。此法适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分的分离；
2、使用离心法时，大分子沉降速度的量度，等于每单位离心场的速度。或s=v\/ω2r。s是沉降系数，ω是离心转子的角速度（弧度\/秒），r是到旋转中心的距离，v是沉降速度；
3、沉降系数以每单位重力的沉降时间表示，并且通常为1～200×10-13秒范围，10-13这个因子叫做沉降单位S，即1S=10-13秒，如血红蛋白的沉降系数约为4×10-13秒或4S。大多数蛋白质和核酸的沉降系数在4S和40S之间，核糖体及其亚基在30S和80S之间，多核糖体在100S以上。
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差速离心法分离什么?
差速离心法（离心法）：1、交替使用低速和高速离心，用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离的方法。此法适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分的分离；2、梯度离心法（浓度梯度）：细胞内的物质具有一定的浓度，把细胞放入清水中，细胞吸水涨破。除去细胞内的其他物质，得到细胞膜；3、密度梯度区带离心法（简称区带离心法），是将样品加在惰性梯度介质中进行离心沉降或沉降平衡，在一定的离心力下把颗粒分配到梯度中某些特定位置上，形成不同区带的分离方法。此法的优点是：①分离效果好，可一次获得较纯颗粒；②适应范围广，能象差速离心法一样分离具有沉降系数差的颗粒，又能分离有一定浮力密度差的颗粒；③颗粒不会挤压变形，能保持颗粒活性，并防止已形成的区带由于对流而引起混合。此法的缺点是：①离心时间较长；②需要制备惰性梯度介质溶液；③操作严格，不易掌握。
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